多次跨膜蛋白（以GPCR为代表）是抗体药领域最具战略价值靶点类别之一，却因多种技术瓶颈长期未被充分开发。
    Cytostar®平台，为破解这一难题提供了全新路径。

    人类基因组中约30%编码膜蛋白，其中GPCR家族拥有800余个成员，调控免疫、代谢、神经等关键生理过程，与肿瘤、自身免疫病、代谢疾病密切相关。

    然而，FDA批准上市的GPCR靶向抗体仅3款（Erenumab、Mogamulizumab、Talquetamab），形成巨大的临床空白。
    尽管膜蛋白是药物靶点的"富矿"，但在抗体药领域，多次跨膜蛋白长期被视为"不可成药"靶点。

难点：四大技术瓶颈

GPCR抗体筛选面临多重技术挑战，核心矛盾在于：

需要维持膜蛋白天然构象以获得功能性抗体，但传统技术依赖于可溶性纯化抗原。

• 结构难：胞外表位仅20-40个氨基酸，以构象表位为主；提取用去垢剂易破坏构象，且GPCR存在多种活性状态，表位动态变化。

• 表达难：重组表达量＜0.1 mg/L，易错误折叠；纯化后常失去配体结合能力，需脂质体/纳米盘重构。

• 筛选难：噬菌体/酵母展示偏好线性表位，无法处理构象敏感靶点；功能性筛选需完整细胞信号通路，通量低且易交叉反应。

• 成药难：7-TM区域高度保守，易脱靶；拮抗剂/激动剂筛选比小分子复杂，且需优化Fc效应功能。

Cytostar®平台全新解决方案

    凌芯生物在完全自主知识产权的Cytostar®高通量单细胞平台上，搭建了基于细胞互作（cell-based assay） 的筛选场景：

▶ 直接使用表达目标GPCR的哺乳动物细胞作为“活抗原”，维持膜蛋白的天然脂双层环境，确保筛选出的抗体能够识别细胞表面的功能性表位。

▶ 集成多参数功能性验证，可在单细胞水平同步检测抗原结合、特异性及初步功能活性（如阻断配体结合），加速先导抗体筛选进程。

    Cytostar®平台高效、系统地解决了GPCR等多次跨膜蛋白抗体筛选的难题，兼具极高的筛选灵活性和使用性价比。

筛选原理示意图

Cytostar®抗体发现流程及时间

案例分享

靶点类型：7次跨膜GPCR家族蛋白

免疫与质控：

采用mRNA免疫，通过基于细胞水平的免疫荧光（IF）检测效价，最终确定符合 1:64K 的检测标准。

同时，IF检测对过表达细胞系进行了质控，明确 ＞90% 的阳性率。

血清学效价检测（IF）

On-chip assay（其中红蓝双色光圈的为分泌阳性抗体的浆细胞，蓝色单光圈的为分泌阴性抗体的浆细胞）

上机完成阳性细胞的挑取并依次进行下游的PCR及重组表达验证，验证结果如下：

抗体验证结果（IF）

通过验证，我们从38个上清抗体中，共获得30个阳性候选物（27个强结合+3个弱结合），筛选阳性率78%。

总结与展望

    单B细胞高通量筛选平台以其独特的技术优势，正在重塑GPCR抗体药物的开发格局：

Cytostar®作为基于单B细胞的国内自主创新平台，我们秉持为客户创造价值的理念，坚持原研与自主创新，不断拓展新的应用场景。

我们相信，这一技术平台将持续赋能GPCR靶向抗体的创新研发，为肿瘤、代谢疾病、自身免疫病等领域带来更具突破性的治疗选择。

【关于凌芯】

单细胞数字星阵（Cytostar^®AbD,Cytostar^®CLD）

⾼通量单菌落⾃动化挑取仪（Scelector^®BCP）