胰腺、胆囊及胆管（统称胰胆管系统）癌症通常侵袭性强且生存率低。由于症状不典型（非特异性）且缺乏精准血液检测手段，这类癌症的早期识别与诊断较为困难。当前诊断需依赖影像学或内镜检查，继而对可疑组织进行采样（活检）以完成组织病理学检查（HPE）。若组织样本质量不佳或取样不足，将阻碍或延误诊断（及治疗）。《Cancers》上一篇名为《基于CTC功能富集与多靶点免疫荧光的胰腺胆管癌液体活检》介绍了一种高精度血液检测技术，通过肿瘤干细胞与正常体细胞不同的增殖与凋亡途径的差异化选择性CTC培养技术及器官特异性标志物的免疫荧光分析实现，可有效检出胰胆管系统癌症。该检测有望为疑似患者（尤其是组织取样诊断结果不明确或无法取样时）提供及时的诊断支持。
背景 (Introduction)
胰腺胆管癌（PBC）因早期症状隐匿，诊断时常已进展至晚期（5年生存率<5%）。现有诊断依赖影像学引导的组织活检，但11%病例因取样失败或结果不确定延误治疗。血清标志物（如CA19.9）和影像学检查特异性不足，亟需高精度无创诊断工具。CTC作为肿瘤特异性标志物，可通过功能富集（选择性培养）和免疫荧光分析提供诊断信息。
研究方法 (Methods)
1.样本来源
病例对照研究：188例PBC患者（初诊未治疗） vs. 172例健康人。
前瞻性研究：88例疑似PBC患者（活检前采血），最终49例确诊恶性，39例良性（如胰腺炎、胆结石）。
盲法分析：操作人员不知样本分组，以组织病理学为金标准验证结果。
2、CTC富集
红细胞裂解后，用专有富集培养基（CEM）诱导非恶性正常体细胞凋亡，保留CTC。
3、免疫荧光分析
A.CTC接种至成像兼容多孔板，固定后依次用荧光标记抗体混合液染色（液相免疫荧光染色）；
B.通过荧光成像系统观察标志物阳性细胞。
阳性判读标准：检测到CK⁺/CA19.9⁺/CD45⁻ 或 CK⁺/Maspin⁺/CD45⁻细胞（无论是否含CK⁺/EpCAM⁺/CD45⁻细胞）。其他结果判为阴性。
4、验证设计
病例对照研究：无症状队列按70%:30%随机分训练集/测试集；PBC病例按分期分层后同比例分配。
前瞻性研究：盲法分析CTC结果，揭盲后比对组织病理结果，评估检测效能。
结果 (Results)
1、病例对照研究
灵敏度：总体96.4%（I期86.7%，II–IV期100%）。
特异性：100%（健康人中无假阳性）。
2、前瞻性研究
灵敏度：95.9%（49例PBC中检出47例），假阴性为2例I期癌。
特异性：92.3%（39例良性中36例正确排除），假阳性为3例（胆囊炎、异位胰腺等）。
3、其他发现
CTC检测率与患者年龄、性别、肿瘤分期无关。
标志物表达稳定，操作者间一致性高（详见补充材料）。
结果讨论 (Discussion)
1、技术优势：
利用肿瘤细胞与正常体细胞的不同增殖与凋亡途径的差异，采用CEM培养基特异性诱导非恶性细胞凋亡，再联合CA19.9/Maspin双标志物检测，实现高特异性（92.3%）和高灵敏度（95.9%）。尤其对早期癌症（I期>90%）和疑难病例（组织取样失败者）具有诊断潜力。
2、临床意义：
(1) 作为组织活检的补充，减少11%取样失败导致的延误。
(2) 血液样本72小时内稳定，抗常见药物干扰。
(3) 无创、成本低，适于基层医疗
Cytoplay®CTC循环肿瘤细胞识别系统
凌芯生物Cytoplay®CTC循环肿瘤细胞识别系统，采用专有软基质芯片直接承载全外周血有核细胞（跳过非必要的富集步骤，避免CTC损失），特异性诱导非恶性细胞凋亡、肿瘤干细胞保留细胞活性，不仅具有高通量、高灵敏度检测能力，同时保留细胞高度活性，低损伤，保障下游培养、多组学分析（单细胞基因组、蛋白组、转录组等均已在临床样本验证）等应用可行性，为个体化癌症诊疗提供全新范式。